服务热线:18616635231

试剂耗材

当前所在位置:首页-试剂耗材-东仁化学

日本同仁Cell Counting Kit-8 (CCK-8/CCK8),细胞增殖-毒性检测试剂盒

产品介绍【返回】

品牌: 同仁
货号: CK04
供应商: 上海觅拓生物科技有限公司
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: 0-5度

Cell Counting Kit-8CCK-8试剂盒)是由同仁化学研究所(Dojindo)开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒,为MTT法的替代方法,试剂盒中采用自己开发的水溶性四唑盐-WST-8,在美国,欧洲等国家地区均持有专利,同仁化学研究所于2006年在中国获得了WST的注册商标。

 

CCK-8法与普通的MTT法相比,具有显著特点:

灵敏度高,数据可靠,重现性好

操作简便,省时省力

水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞

无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低

1瓶溶液,毋需预制,即开即用

适合于高通量药物筛选

CCK-8用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验


Q&A
1. 每孔应该接种多少细胞?
贴壁细胞每孔至少需要接种1,000个细胞 (100 μl的培养基),检测白细胞时由于它的灵敏度较低,每孔至少需要接种2,500 个细胞 (100 μl的培养基),建议先做几个孔摸索接种细胞的数量。如果要使用24孔板或是6孔板实验,请先计算每孔相应 的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK- 8溶液。
2. 如何设定空白对照?
在不含细胞的培养基中加入CCK- 8,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验 (细胞毒性实验) 时,还应考虑药 物的吸收,可在不含细胞,加入药物的培养基中加入CCK- 8,测定450 nm的吸光度作为空白对照。
3. 哪些物质会影响CCK- 8的测定?
当有还原性物质存在时会影响CCK- 8的测定,增加O.D值;在有氧化性物质存在时会抑制测定反应的发生,减小O.D值; 在有酚红存在的情况下,会增加空白吸收,但不影响测定,扣除空白吸收即可。
4. 在做加药实验时,药物对测定是否有影响?如何解决?
有时会有影响。如果药物具有还原性,就会和CCK- 8试剂发生显色反应,增加吸光度。解决办法:首先要确认药物是否 有吸收,在含有药物的培养基中加入CCK- 8,测定450 nm的吸光度,如果它的吸光度比不含药物的培养基 (只加CCK-8) 的吸光度高,则证明药物有影响,可在加CCK- 8之前更换培养基,去掉药物的影响。
5. CCK- 8对细胞的毒性大小如何?
CCK- 8对细胞的毒性相当低,同样的细胞在CCK- 8法检测后还可用于其他细胞增殖的检测实验,如结晶紫检测法,中性 红检测法或DNA荧光检测法等。
6. CCK- 8的保质期有多久?
CCK- 8在避光0-5℃的条件下可以存放1年,在-20℃下避光可以保存2年。如果需要长期保存,我们推荐在-20℃储藏。 在常温下可以保存3周左右,颜色应该为浅红色,如果颜色发生改变,则可能会增加空白吸光度。
7. 我没有450 nm的滤光片,还可以使用哪些其他的滤光片?
您可以使用吸光度在430-490 nm之间的滤光片,但是450 nm滤光片的检测灵敏度最高。
8. CCK- 8能否对活细胞进行染色?
不能。因为CCK- 8的主要成分是一种水溶性的四唑盐 (WST®- 8),并通过电子载体1- Methoxy PMS将活细胞中的电子交 换到培养基中的WST®- 8上,因为WST®- 8及其生成的甲臜染料是高度水溶性的,不会进入细胞内,所以CCK- 8不能对 活细胞进行染色。
9. 必须设定参比波长吗?设定的目的是什么?
不一定要设定,CCK- 8试剂在参比波长处没有吸光度。设定参比波长的目的是为了去除由于样品浑浊所带来的吸收。
10. 如果O.D值太低,可以采取什么办法? 可以采取2个办法:
① 适当增加细胞数量。
② 延长加入CCK- 8试剂后的染色时间。
 
点击关闭

  • 微博

    微信
关于我们
公司动态
细胞产品
建系细胞
原代细胞
实验用干细胞
质粒,载体
感受态细胞
试剂耗材
细胞培养试剂
胎牛血清Gibco,Hyclone,sigma
支原体检测与清除
试剂盒
外泌体研究
核酸提取
PCR及RT-PCR产品
抑制剂
其他
克隆载体及其相关产品
电泳相关产品
蛋白质研究相关
仪器设备
细胞电穿孔仪
离心机
移液器
耗材
技术服务
分子生物学技术服
细胞生物学技术服务
蛋白相关技术服务
病毒类技术服务
动物实验类技术服务
组织形态学技术服务
实验经验交流
联系我们
公司简介
联系方式
采购平台与展示渠道
人才招聘
PK10计划 北京赛车平台 分分彩 极速时时彩开奖号码 PK10计划 极速时时彩群 幸运飞艇